通过载体把目的基因片段导入活细胞。构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接,使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
基因表达载体的构建是基因工程最重要的一个步骤。将目的基因与载体通过DNA连接酶连接形成一个整体,方便后续载体携带目的基因进入受体细胞,并将目的基因成功与受体细胞转导。
目的基因就是能够产生所需蛋白质的DNA片段,比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子:启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译,到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。
标记基因:用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体。比如抗虫棉,判断是否植入,用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因(如果目的基因成功植入,抗四环素基因也一起植入),然后用四环素来淘汰植入失败的个体,剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因,还有荧光基因等,总之就是方便检测。